طراحی و ساخت وکتور خودکشی pds۱۳۲-δkanr به منظور حذف ژن مقاومت به آنتی-بیوتیک کانامایسین در بروسلا ملی تنسیس سویه rev۱ جهش یافته برای تولید سویه کاندید واکسن
نویسندگان
چکیده
زمینه و اهداف: بروسلوز از مهم ترین بیماری های مشترک انسان و دام محسوب می گردد. بهترین راه مقابله با بروسلوز انجام واکسیناسیون مناسب میباشد. واکسنهای موجود از قبیل واکسن rev1 با معایبی چون سقط جنین در حیوانات باردار همراه است لذا تهیه واکسن مناسب برای درمان بروسلوز ضروری می باشد. هدف از انجام این مطالعه، طراحی و ساخت وکتور خودکشی pds132-δkanr به منظور حذف ژن مقاومت به آنتیبیوتیک کانامایسین در بروسلا ملیتنسیس سویه rev1 جهشیافته برای تولید سویه کاندید واکسن بود. مواد و روش کار: در این مطالعه برای حذف ترادف هدف، تصمیم به استفاده از پلاسمید pds132 به عنوان وکتور خودکشی گرفته شد. بمنظور ساخت کاست حذف، پس از طراحی و سنتز جداگانه قطعات دارای همولوژی با ترادفهای هدف، این قطعات جهت ساخت قطعه واحد، با استفاده از آنزیمهای محدودگر مناسب در وکتور pbluescriptsk(-) کلون شد. سپس به منظور ساخت وکتور خودکشی، قطعه کاست حذف با استفاده از آنزیم های محدودگر مناسب از وکتور فوق جدا و در وکتور pds132 ساب کلون شد. یافته ها: وکتور خودکشی pds132-δkanr با در برداشتن 590 جفت باز از توالی بالادست و 421 جفت باز از توالی پاییندست ترادف هدف میتواند به عنوان یک ناقل خودکشی اختصاصی در ایجاد تداخل در ژن kanr در ژنوم باکتریبروسلا ملیتنسیس سویه rev1 جهش یافته موجب حذف مقاومتآنتی بیوتیکی در آن بشود. نتیجه گیری: استفاده از سیستم خودکشی مورد نظر با استفاده از وکتور pds132-δkanr، ایجاد جهش هدفمند را تسهیل و در مقایسه با سایر روش های خودکشی وابسته به مارکر مثبت و نیز روش های ابتدایی مانند پاساژ متوالی، روش موثرتری میباشد.
منابع مشابه
طراحی و ساخت وکتور خودکشی pDS132-ΔkanR به منظور حذف ژن مقاومت به آنتی-بیوتیک کانامایسین در بروسلا ملیتنسیس سویه Rev1 جهشیافته برای تولید سویه کاندید واکسن
زمینه و اهداف: بروسلوز از مهمترین بیماری‌های مشترک انسان و دام محسوب می‌گردد. بهترین راه مقابله با بروسلوز انجام واکسیناسیون مناسب میباشد. واکسنهای موجود از قبیل واکسن Rev1 با معایبی چون سقط جنین در حیوانات باردار همراه است لذا تهیه واکسن مناسب برای درمان بروسلوز ضروری می باشد. هدف از انجام این مطالعه، طراحی و ساخت وکتور خودکشی pDS132-ΔkanR به منظور حذف ژن مقاومت به آنتیبیوتیک کانامایسین د...
متن کاملحذف ژن پروزامین سنتتاز در باکتری بروسلا ملی تنسیس Rev1 بمنظور تولید سویه ضعیف شده
مقدمه: هدف از این مطالعه، انجام حذف ژنی در باکتری بروسلا ملی تنسیس Rev1 به منظور دستیابی به یک سویه تضعیف شده، بود. بدین منظور تلاش گردید تا ژن کدکننده آنزیم پروزامین سنتتاز(per) ، یکی از ژنهای درگیر در تشکیل ساختار زنجیره O از LPS دیواره باکتری، از طریق انجام نوترکیبی همساخت حذف گردد. مواد و روشها: نوترکیبی همساخت با استفاده از وکتور خودکشی حامل کاست حذف که شامل ترادف نوکلئوتیدی کدکننده مق...
متن کاملحذف ژن پروزامین سنتتاز در باکتری بروسلا ملی تنسیس rev۱ بمنظور تولید سویه ضعیف شده
مقدمه: هدف از این مطالعه، انجام حذف ژنی در باکتری بروسلا ملی تنسیس rev1 به منظور دستیابی به یک سویه تضعیف شده، بود. بدین منظور تلاش گردید تا ژن کدکننده آنزیم پروزامین سنتتاز(per) ، یکی از ژنهای درگیر در تشکیل ساختار زنجیره o از lps دیواره باکتری، از طریق انجام نوترکیبی همساخت حذف گردد. مواد و روشها: نوترکیبی همساخت با استفاده از وکتور خودکشی حامل کاست حذف که شامل ترادف نوکلئوتیدی کدکننده مقاو...
متن کاملطراحی و ساخت حامل انتحاری pds۱۳۲::∆virg به منظور حذف ژن virg در شیگلا فلکسنری ۲a برای تولید سویه واکسنی زنده تخفیف حدت یافته شیگلا
زمینه و هدف: سویه های شیگلا باکتری های گرم منفی هستند که واجد توانایی ورود به درون سلول های غیر فاگوسیتیی، از طریق ترشح پروتئین های افکتور (که آنتی ژن های تهاجمی نامیده می شوند (ipas)) می باشند. یکی از مهمترین آنها پروتئینvirg است. واکسن های زنده تخفیف حدت یافته شیگلا، پاسخ های امیدوار کننده ای را در ایجاد ایمنی حفاظتی در مطالعات بالینی بر روی انسان از خود نشان داده اند. در شرایط حاضر، ساخت سوی...
متن کاملمروری بر استفاده واکسن دز کاهیده بروسلا ملی تنسیس سویه Rev.1 در دامهای بالغ
بروسلوز یکی از مهمترین زئونوزها بوده که بوسیله گونه‌های مختلف بروسلا به ویژه بروسلا ملیتنسیس ایجاد می‌گردد. آسان‌ترین راه کنترل بیماری واکسیناسیون تمام نشخوارکنندگان کوچک میباشد. واکسن بروسلا ملیتنسیس سویه Rev.1 به عنوان بهترین واکسن موجود و مورد استفاده برای پیشگیری بروسلوز است. روش توصیه شده برای کنترل بیماری واکسیناسیون بره‌ها و بزغاله‌ها با یک دز استاندارد و جایگزینی با دامهای بالغ ب...
متن کاملحذف ژن پروزامین سنتتاز (per)و مهار بیان اپرون virb در باکتری بروسلا ملی تنسیس سویه rev1 بمنظور تهیه سویه جهش یافته ضعیف شده
هدف از این مطالعه، داخل کردن کاست بیانی آنتی سنس درون کروموزوم باکتریایی جهت کاهش بیان طولانی مدت ژن هدف، و استفاده از کاست بیانی آنتی سنس (ابزار اصلی ناک داون ژنی) برای انجام حذف ژنی (ناک اوت) در سیستم باکتریایی، بود. لذا این روش برای حذف همزمان ژن کدکننده آنزیم پروزامین سنتتاز (per) و کاهش بیانی ژن virb1 در باکتری بروسلا ملی تنسیس سویه rev1 برای دستیابی به سویه جهش یافته ضعیف شده ای از آن بکا...
منابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله میکروب شناسی پزشکی ایرانجلد ۱۰، شماره ۲، صفحات ۲۳-۳۲
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023